فروشگاه تخصصی فروش فایل ها و تحقیقات دانشجویی و قطعه کدهای برنامه نویسی و ویدیو های آموزشی

دسته بندی محصولات

محبوبترین محصولات

اطلاعیه فروشگاه

توجه : به لطف خداوند متعادل و تلاش مضاعف و پشتیبانی خوب فایل سل سایت پارس هم اکنون به رتبه 10 در فایل سل دست پیدا کرده است توجه : دانشجویان و افرادی که قصد خرید دارند و ایمیل ندارند برای خرید میتوانند ایمیل مدیر فروشگاه را به آدرس moradi.infomail@gmail.com وارد کنند و با این ایمیل و شماره تلفن خودتون اقدام به خرید کنید و در صورت مشکل میتوانید با شماره پشتیبانی فروشگاه در تلگرام با شماره 09398634021 ارتباط برقرار کنید

تحقیق در مورد تكنيك PCR و كاربرد آن

تحقیق در مورد تكنيك PCR و كاربرد آن

فورمت فایل:word(قابل ویرایش) تعداد14 صحفه

 

 

 

بدون ترديد در بين روشهاي مختلف مهندسي ژنتيك كه به منظور تشخيص سريع عوامل بيماري‌زا مورد استفاده قرار مي‌گيرند، تكنيك PCR 1 داراي جايگاه خاصي مي‌باشد كه علي‌رغم نوپا بودن در طي ساليان اخير با پيشرفت چشمگيري همراه بوده است ] 1 [ .

اين روش كاربردهاي زيادي در جنبه‌هاي مختلف علوم بهداشتي و پزشكي به ويژه ميكرب‌شناسي مواد غذايي دارد كه از مهمترين آنها مي‌توان به تشحيص سريع عوامل بيماري‌زا ( باكتريها، ويروس‌ها، انگل‌ها، قارچ‌ها) و سموم آنها اشاره نمود ] 5،2 [ .

اين تكنيك از نظر اصول علمي تشابه زيادي به همانند سازي DNA داشته و در واقع برگرفته از آن است. هر سيكل PCR شامل مراحل مختلف دناتوره كردن DNA ، اتصال پرايمرها به هدف و پليمريزاسيون و تكثير قطعه هدف ( DNA يا RNA ) مي‌باشد ] 7 [ .

روشهاي متداول و مرسوم فعلي كه در آزمايشگاه‌هاي مواد غذايي به منظور تشخيص عوامل و سموم ايجادكنندة عفونتها و مسموميت‌هاي غذايي به كار مي‌روند، داراي معايب بسياري هستند؛ در حاليكه تكنيك PCR علاوه بر نداشتن اين نقاط ضعف، داري محاسن زيادي است كه از آن جمله مي‌توان دقت و سرعت بالا، قدرت تشخيص طيف وسيعي از عوامل بيماري‌زا در مقادير بسيار كم، و سادگي روش كار را نام برد ] 7،8 [ .

با توجه به حجم خريد بسيار زياد انواع مختلف مواد غذايي در نيروهاي مسلح و ضرورت وجود كنترل كيفيت ميكروبي اين مواد در كمترين زمان ممكن، مي‌توان از روش PCR در تشخيص سريع عوامل ميكروبي و سموم آنها به اين منظور استفاده نمود.

مقدمه

در ساليان اخير، مهندسي ژنتيك و بيوتكنولوژي پيشرفت چشمگيري در زمينه بيولوژي مولكولي و ارائه روشهاي جديد داشته است و محققان تمايل زيادي به استفاده از روشهاي ژنتيكي براي تشخيص عوامل بيماري‌زا از خود نشان‌ داده‌اند.

PCR يكي از اين روش‌هاي جديد است كه علي‌رغم نوپا بودن، اميد زيادي به استفاده از آن در زمينه‌هاي مختلف دارند و پيشرفت‌هاي شگرفي نيز در اين راستا صورت گرفته است. حقيقت اين است كه تاحدود 30 سال پيش ميليونها كپي از يك ترادف 1 اسيد نوكلئيك در آزمايشگاه 2 و يا همانندسازي از يك ترادف اسيدنوكلئيك در لوله‌ آزمايش، افسانه‌اي بيش نبود تا اينكه در سال 1971، Kleppe و همكاران اجزاي اساسي و لازم براي توليد كپي‌هاي متعدد از يك ترادف اسيد نوكلئيك در آزمايشگاه را تشريح نمودند و به دنبال آن در سال 1983 دانشمندان آمريكايي موفق به توليد ميليونها كپي از اسيدنوكلئيك در آزمايشگاه شدند و اين فرآيند را واكنش زنجيره‌اي پليمـراز « PCR » ناميدند. Saiki و همكارانش در سال 1985 اولين كاربرد علمي اين تكنيك را به چاپ رساندند و Kary Mullis مخترع دستگاه PCR در سال 1993 جايزه نوبل شيمي را به علت تحقيقات ارزشمند خود دريافت كرد (1،5،7). اين تكنيك تمامي مشكلات پيشين در بيولوژي مولكولي را كه ناشي از عدم دسترسي به مقادير زياد DNA يكسان بود، برطرف نمود. به عنوان مثال در گذشته براي بدست آوردن نسخه‌هاي متعدد از يك ژن خاص، آن را به داخل حامل مناسب وارد مي‌كردند. و سپس در يك باكتري تكثير مي‌نمودند در حالي‌ كه امروزه با استفاده از PCR تكثير نسخه‌هاي متعدد از يك ژن به سادگي و در اسرع وقت صورت مي گيرد به طوري كه مي‌توان در عرض چند ساعت عامل بيماري‌زا را تشخيص داد ] 5،7 [ .

امروزه استفاده از اين روش داراي طيف گسترده‌اي بوده و در جنبه‌هاي مختلف مهندسي ژنتيك، بيولوژي مولكولي، ميكروب‌شناسي تشخيصي، تعيين هويت افراد (پزشكي قانوني) و حتي باستان‌شناسي مورد استفاده قرار مي‌گيرد. اين تكنيك در ميكروب‌شناسي مواد غذايي نيز داراي كاربرد بسيار زيادي بوده و امروزه بسياري از عوامل مسموميت‌زا و توكسين‌هاي باكتريايي و قارچي توسط اين تكنيك سريع و دقيق مورد شناسايي قرار مي‌گيرند. به علاوه امروزه موضوع جنگ‌هاي بيولوژيك و تهديدات آن يكي از مباحث مهم در نيروهاي نظامي به ويژه سپاه پاسداران مي باشد كه مي‌توان از اين تكنيك در تشخيص سريع آلودگي‌هاي آب و مواد غذايي آلوده استفاده نمود.

تكنيك PCR و مواد و وسايل لازم

PCR يكي از روش‌هاي ژنيتيكي و نوتركيبي DNA 3 است كه در آن قسمتي از رشته و زنجيره DNA پلي‌مريزه و بزرگ مي‌گردد و براي انجام اين واكنش به يك سري مواد و وسايل نياز است كه عبارتند از:

  1. DNA يا RNA الگو 4 : براي انجام واكنش زنجيره‌اي، ابتدا بايستي قطعه مورد نظر ( DNA يا RNA ) را در اختيار داشته و اسيدنوكلئيك ( N.A ) آن تخليص گردد كه اين عمل با استفاده از روش‌هاي مختلفي نظير جوشاندن 5 ، انجماد، استفاده از آنزيم پروتئاز به همراه بافر ليزكننده 6 صورت مي‌گيرد.
  2. پرايمر 7 : پرايمرها قطعات سنتز شده‌اي از بازهاي آلي هستند كه براساس قطعه مورد نظر الگوهاي هدف ساخته مي‌شوند.كار پرايمرها اين است كه به رشته مخالف خودشان در دوانتهاي DNA تك رشته‌اي متصل مي شوند و سپس با استفاده از آنزيم DNA پلي‌مراز، اين قسمت از DNA ، بزرگ و تكثير مي‌گردد. توالي رديف‌هاي نوكلئيدها در پرايمر بايد به دقت انتخاب شود. اولين سيكل براي ادامه واكنش، بسيار مهم و اساسي است زيرا اين سيكل، الگو را براي سيكل بعدي فراهم مي‌كند. معمولاً بين 20 تا30 نوكلئوتيد (قطعات كوچكتر پرايمر) براي تشخيص به كار مي‌رود.
  3. آنزيم تك‌پلي‌مراز 1 : اين آنزيم وظيفه بزرگ كردن و تكثير قطعه مورد نظر DNA را بر عهده دارد. قبل از كشف اين آنزيم، مرحله بزرگ كردن و تكثير الگوي مورد نظر به علت وجود دماي بالا در اين مرحله oC (ْ75) با مشكلات زيادي به همراه بود به طوري‌كه پس از هر بار دناتوره كردن DNA ، آنزيم تازه‌اي به مخلوط واكنش اضافه مي‌شد، ولي با كشف نوعي باكتري دريايي گرما دوست به نام ترموس آكواتيكوس 2 و استخراج آنزيم تك‌پلي‌مراز از آن ، مشكل فوق مرتفع گرديد . امروزه از اين آنزيم براي تكثير و ازدياد قطعه مورد نظر استفاده مي‌گــــردد ] 6،4 [ .
  4. بازهاي سازنده DNA (داكسي نوكلئو زيدتري فسفات 3 ): اين بازها شامل آدنين ، سيتوزين، گوانين و تيمين مي‌باشند. يك PCR به طور طبيعي با غلظت 100 ميكرومول از (MM) از DNTP انجام مي‌شود. اگر چه در غلظت‌هاي پايين‌تر داراي مقدار بالاتري است، با اين وجود غلظت DNTP بستگي به غلظت بافر، غلظت پرايمر، طول محصول تكثير شونده و مقدار سيكل‌هاي PCR دارد و بهترين حالت زماني است كه غلظت DNTP به طور تجربي تعيين شود ] 4،1 [ .
  5. الكتروفورز ژل‌آگارز 4 : الكتروفورز وسيله‌اي است كه براي جداسازي قطعات بزرگ DNA كه داراي واحد سايز بين 800 تا 2000 جفت باز متغير است، به كار مي‌رود و اساس كار آن حركت مولكول‌هاي DNA با بار منفي در يك ميدان الكتريكي براساس وزن مولكولي آنهاست . روش كار به اين صورت است كه ابتدا پس از ريختن ژل آگارز در داخل قالب مربوطه، پروتئين مجهول (يا قطعه مورد نظر) را كه بايد اسيد آمينه‌هاي آن شناسايي گردند، وارد دستگاه مي نمايند. اين دستگاه توسط دو الكترود به برق متصل شده و مولكول‌هاي DNA كه داراي بارمنفي هستند، براساس وزن مولكولي خود از قطب منفي به سمت قطب مثبت حركت مي‌كنند. پس از خارج شدن مولكولها و مقايسة اندازه و سايز آنها با استاندارد‌ها، نوع اسيدآمينه و نوع پروتئين تشخيص داده مي‌شود. محصولات PCR نيز بوسيلة الكتروفورز ژل‌آگارز، در حضور شاهد مناسب تجزيه شده و بعد از رنگ‌آميزي با اتيديوم‌برومايد توسط تاباندن اشعه ماوراء بنفش به ژل و انعكاس درخشش فلوئورسانس قابل مشاهده مي گردنــد ] 7،2 [ .
  6. نمايشگر(شاخص) : پس از الكتروفورز، حاصل واكنش را به روي فيلترهاي غشايي نيتروسلولز انتقال مي‌دهند و با پروب‌هاي 5 آماده كه غالباً داراي اليگونوكلئوتيد‌هاي نشاندار هستند، شناسايي مي‌كنند. به طور كلي استفاده از پروب‌هاي آماده DNA يكي از روش‌هاي مناسب براي تشخيص ميكروب‌ها به شمار قطعه كوچكي از DNA يا RNA تك‌رشته‌اي را به صورت پروب درآورده در اختيار دارند كه توسط مواد راديواكتيو يا آنزيم نشان‌دار شده‌اند. معمولاً اين پروب‌آماده را روي فيلترهاي غشايي در مجاورت قطعه DNA ميكروب مجهول قرار مي‌دهند و چنانچه اين دو قطعه همولوگ 1 باشند (و با يكديگر جفت شوند) و هيبريد 2 تشكيل دهند، از فيلترهاي غشايي عبور نكرده و بدين شكل ميكروب مورد نظر شناسايي مي‌گردد . چنانچه هيبريد تشكيل نگردد، قطعه DNA تك رشته‌اي از فيلتر عبور خواهد كرد.
  7. بافر : براي انجام واكنش PCR مي‌توان از بافرهاي مختلفي استفاده نمود كه متداول‌ترين آنها بافري است كه به شكل X 10 وجود دارد كه شامل 100ميكرومول تريس اسيدكلريدريك 3 با 3/8 = PH ، 500 ميكرومول پتاسيم كلريد، 15 ميكرومول منيزيوم كلريد و 1/0درصد ژلاتين مي‌باشد ] 6،3،1 [ .

روش كار PCR

در اين روش با استفاده از پرايمرها و آنزيم تك‌پلي‌مراز، قسمتي از ژن يا DNA دو رشته‌اي را در داخل دستگاه PCR تكثير و پلي‌مريزه مي‌كنند. در واقع تكثير و ازدياد محصول PCR توسط پرايمرهاي اوليگونوكلئوتيد سنتز شده صورت مي‌گيرد و اندازة تكثير سكانس يا قطعه مورد نظر، بستگي كامل به فاصلة بين دو پرايمر پيوندشده به زنجيره دارد و تعداد سيكل‌هاي تكراري نيز در مقدار توليد نقش بسيار مهمي دارند . به طور كلي هر سيكل PCR شامل چند مرحله است:

  • 1. دناتوره كردن 4 : در اين مرحله قطعه DNA مورد نظر را كه به صورت دورشته‌اي مي‌باشد (رشته الگو) را در دماي c ْ95-90 دناتوره كرده و از حالت دورشته‌اي در مي‌آورند. بهترين درجه حرارت پيشنهاد شده براي دناتوره كردن، oC ْ94 به مدت 1 دقيقه است ] 5،1 [ .
  1. اتصال پرايمرها به هدف 5 : در اين مرحله پرايمرها را به دو انتهاي DNA تك رشته‌اي متصل مي‌كنند كه با سرد كردن مخلوط واكنش در دماي oC 60-40 انجام مي گيرد. مدت زمان مناسب براي اتصال محكم پرايمرها به قطعه مورد نظر 45 ثانيه در oC ْ54 پيشنهاد گرديده اسـت ] 5 [ .
  2. مرحله گسترش دادن و بزرگ كردن 6 : پس از اتصال پرايمرها به دو انتهاي DNA هدف، دما را به oC ْ72 مي‌رسانند و سپس با استفاده از آنزيم مقاوم به حرارت به نام تك‌پلي‌مراز، DNA هدف را بزرگ و تكثير مي‌كنند و به اين شكل از يك قطعه، دو قطعه و از دو قطعه، چهار قطعه ونهايتاً با سرعت خيلي زياد يك قطعه كوچك DNA را بزرگ كرده و به راحتي تشخيص مي‌دهند (35 سيكل) يك واكنش موفق PCR ، قادر به توليد 10 12 مولكول DNA در 1/0 ميلي‌ليتر از واكنش مي‌باشد ] 6 [ .

كاربردهاي PCR

PCR داراي كاربردهاي زيادي در عرصه‌هاي مختلف بيولوژي، بيوتكنولوژي، مهندسي ژنتيك، جرم‌شناسي ومي باشد. علت اصلي كاربردهاي زياد آن اين است كه DNA الگوي به كار رفته در PCR را مي‌توان از منابع مختلف تأمين و تكثير نمود ] 7،2 [ .

مهمترين موارد كاربرد اين تكنيك عبارتند از:

  1. تشخيص سريع عوامل بيماري‌زا: يكي از مهمترين و متداول‌ترين كاربردهاي PCR ، تشخيص سريع و دقيق عوامل بيماري‌زاي ميكروبي (باكتريها، ويروس‌ها، قارچ‌ها، انگل‌ها) و توكسين آنها مي‌باشد. عوامل ميكروبي كه با اين تكنيك قابل تشخيص مي‌باشند، كه در جدول «1» آمده است. روش كار به اين صورت است كه ابتدا DNA باكتري مورد نظر با استفاده از حرارت و يا مواد شيميايي جدا نموده و سپس با استفاده از كيت‌هاي آماده آن را تكثير و بزرگ مي‌نمايند و به راحتي تشخيص مي‌دهند (تصوير شماره1).

 

   

روش‌هاي فعلي مورد استفاده براي تشخيص بيماري‌هاي عفوني، به كار مي‌روند براساس آزمايشاتي پايه‌ريزي گرديده‌اند كه خصوصيات فنوتيپي ميكروبها نظير شكل، رنگ، اندازه، نوع حركت، ميزان مقاومت در برابر PH و نمكرا به تصوير مي‌كشند و اطلاعات زيادي در مورد خصوصيات ژنوتيپي ميكروبها در اختيار ما نمي‌گذارند. اين روش‌ها با وجود ارزش‌هايي كه دارند، داراي معايبي هستند كه از آن جمله مي‌توان به اين موارد اشاره نمود:

  •   1. كشت و تشخيص عوامل بيماري‌زا در محيطهاي كشت مستلزم صرف زمان زيادي است. به عنوان مثال تشخيص عوامل بيماري سل و سالمونلوز چندين روز به طول مي‌انجامد.
  • 2. در مورد برخي از ميكروبها نظير ويروس هپاتيت، ويروس فلج اطفال وسيستم كشت روتين وجود ندارد و تشخيص آنها با روشهاي موجود امكان پذير نيست.
  • 3. برخي ميكروبها در محيط‌هاي كشت به سختي رشد مي‌نمايند و براي رشد به مواد غذايي خاصي نياز دارند بنابراين جدا نمودن آنها در آزمايشگاه با مشكلات زيادي همراه است كه از آن جمله مي‌توان به بروسلا آبورتوس 1 ، مايكوباكتريوم توبركلوزيس 2 و مايكوپلاسما پنومونيه 3 اشاره نمود.
  1. هزينه جداسازي و تعيين هويت برخي از ميكروبها نظير كوكسيلابورنتي 4 ، يرسينيا پستيس 5 وبسيار بالا مي‌باشد.
  2. حتي در بهترين شرايط، تنها درصد كمي از جمعيت ميكروبي يك نمونه قادر به رشد در آزمايشگاه مي باشند.

با توجه به وجود اين مشكلات ، جايگزين نمودن و استفاده از روشها و تكنيك‌هاي جديد نظير PCR ، براي تشخيص عوامل بيماريزا كاملاً ضروري و اجتناب ناپذير است.تكنيك PCR علاوه بر نداشتن مشكلات فوق، داراي محاسن زير مي‌باشد ] 8،7،3 : [

  • 1. قدرت تشخيص و شناسايي طيف وسيعي از عوامل ميكروبي (باكتري‌ها، ويروس‌ها، تك‌ياخته‌ها و قارچ‌ها) و سموم آنها.
  • 2. داشتن قابليت تكرار.
  • 3. دقت و سرعت بالا .
  • 4. سادگي روش كار .
  • 5. عدم وجود واكنش متقاطع بين عوامل ميكروبي .
  • 6. قدرت تشخيص عامل در نمونه‌هاي مختلف مرضي و محيطي.
  • 7. قدرت تشخيص عامل در مقادير بسيار كم.

با توجه به مطالب فوق، مي‌توان دريافت كه بدون هيچگونه شك و ترديد اين روشهاي مدرن و جديد بايستي جايگزين روش‌هاي سنتي و متداول امروزي گردند.

جدول شماره 1: ليست عوامل ميكروبي (باكتريها ، ويروسها، انگل‌ها، قارچ‌ها) كه به وسيله تكنيك PCR شناسايي گرديده‌اند(1) :

الف) باكتريهاي بيماريزا:

Bacterial Pathogen

Mycobacterium sp.

Mycobacterium tuberculosis

Mycobacterium leprae

Mycobacterium avium-intracellulare

Chlamydia trachomatis

Borrelia burgdorferi

Mycoplasma pneumoniae

Mycoplasma sp.

Mycoplasma fermentans

Salmonella typhimurium

Bordetella pertussis

Legionella pneumophila

Clostridum difficile

Treponema pallidum

Enterotoxigenic escherichia coli

Enterohemorrhagic escherichia coli

Vibrrocholerae

Shigella sp.

Rickettsia sp.

Ehrlichia sp.

Chlamydia pnemumiae

Staphylococcus aureus

Staphylococcos aureus toxins

Bacterial meningitis pathogens

Whipple's disease – associated bacterium

Yersinia pestis

Yersinia enterocolitica

Helicobacter pylori

Aeromonas hydrophila

Bacillary angiomatosis agent

Listeria monocytogenes

Comamonas sp.

Bacillus anthracis

Coliform bacteria

Ureaplasma urealyticum

Neisseria meningitidis

Neisseria gonorrhoeae

Mycoplasma genitalium

Camphylobacterium sp.

Corynebacterium diphtheriae

Aotinobacillus pleuropnemoniae

Leptospira sp.

Haemophilus influenzae

Propionibacterium acnes

Bacteriodes fragilis

Haemophtlius ducreyl

Porphyromonas gingivalis

Bartonella bacilliformis

ب) ويروسهاي بيماريزا

Viral pathogen

Hepesviride

Herpes simplex virus types I and II

Epstein- Barr virus

Cytomegalovius

Varicella – Zoster virus

Human herpesviruses 6 and 7

Papovaviridae

Human JC Virus

Human papillomavirus

Flaviviridae

Hepatitis C virus

Enteroviruses

Hepadnaviridae

Hepatitis B virus

Retruviridae

HIV-I and HIV-II

HTL . V – I and HTL V-II a

  1. V b

Orthomyxoviridae

Influenza virus

Parvoviridae

Human Parvovirus B 19

Adenoviridae

Human adenovirus

Togaviridae

Rubella virus

Picornviridae

Rhinovirus

Hepatitis A virus

a:HTL V . human T-cell leukemia virus; b:HBL V, Human B-lymphototropic virus

ج) تك ياخته‌هاي بيماريزا

Protozoal pathogen

Babesia bigemina

Babesia bovis

Babesia microti

Entamoeba histolytica

Giardia lamblia

Leishmania sp.

Naegleria fowleri

Plasmodium falciparum

Toxoplasma gondii

Trichomonas vaginalis

Trypanosoma sp.

د) قارچهاي بيماريزا

Fungal pathogen

Blastomyces dermatitidis

Candida albicans

Coccidioides immitis

Cryptococcus neoformans

Hictoplasma capsulatum

Pneumosystis carinit

Trichosporon beigelii

تشخيص بيماري‌هاي ژنتيكي قبل از تولد: (Prenatal diagnosis)

بسياري از بيماري‌هاي ژنتيكي در جنين مانند هموفيلي و تالاسمي، ناويسم، فنل‌كتون‌اوريرا در دوران حاملگي مي‌توان با استفاده از اين تكنيك تشخيص داد . روش كار به اين صورت است كه مقداري از سلول‌هاي جنيني را استخراج كرده و با پرايمر اختصاصي آن ژن مولد بيماري، مجاور مي‌كنند. براي كنترل آزمايش آن را به طور جداگانه با ژن سالم نيز مجاور كرده و PCR را انجام مي دهند. پس از پايان PCR حالات مختلفي پيش خواهد آمد بدين صورت كه چنانچه در هر دو لوله سنتز DNA انجام گيرد جنين داراي يك ژن سالم و يك ژن بيمار است (يعني حامل مي‌باشد و بيمار نيست). اگر سنتز DNA فقط در لوله‌اي كه شناساگر مخصوص ژن بيمار وجود دارد، انجام گيرد، جنين بيمار بوده و بايد سقط شود. اگر سنتز DNA فقط در لوله‌اي كه حاوي شناساگر ژن سالم است انجام گيرد، جنين كاملاً سالم است ] 1،7 [ . لازم به ذكر است كه علاوه بر موارد فوق از تكنيك PCR در تعيين جنسيت جنين، تشخيص سرطان، و تعيين هويت افراد (پزشكي قانوني) نيز استفاده مي گــردد ] 2،7،5 [ .

نتيجه‌گيري

امروزه روش‌ها و تكنيك‌هاي جديد حاصل از مهندسي ژنتيك و بيوتكنولوژي به تدريج جايگزين روشهاي سنتي و متداول گرديده‌اند. تكنيك PCR به عنوان يكي از جديدترين روشهاي تشخيص سريع مولكولي مطرح گرديده است و از آن در شاخه‌هاي مختلف علوم پزشكي از جمله ميكروب‌شناسي و بويژه ميكروب‌شناسي غذايي استفاده مي‌گردد. ويژگي‌ها و خصوصيات زياد اين تكنيك از جمله سرعت و دقت بالاي آن در تشخيص عوامل و توكسين‌هاي ايجادكننده مسموميت‌هاي غذايي خطرناك در مقايسه با روش‌هاي معمول و متداول مورد استفاده در آزمايشگاهها، باعث گرديده است تا محققين به تدريج آن را جايگزين روش‌هاي سنتي نمايند. امروزه در بسياري از مراكز تحقيقاتي از اين روش براي تشخيص ارگانيسم‌هاي مختلف ( باكتريها، ويروسها، انگل‌ها و قارچها) استفاده مي‌گردد. همچنين از اين تكنيك در تشخيص بيماريهاي ژنتيكي قبل از تولد، تعيين جنسيت جنين، تشخيص سرطان‌ها و تعيين هويت افراد، استفاده گرديده است.


اشتراک بگذارید:


پرداخت اینترنتی - دانلود سریع - اطمینان از خرید

پرداخت هزینه و دریافت فایل

مبلغ قابل پرداخت 11,000 تومان

درصورتیکه برای خرید اینترنتی نیاز به راهنمایی دارید اینجا کلیک کنید


فایل هایی که پس از پرداخت می توانید دانلود کنید

نام فایلحجم فایل
100-file-word_2_882366_8109.zip3.6 MB





ویدئو آموزشی کسب درآمد میلیونی با بازاریابی فایل در وردپرس(آموزش توسط رتبه 10 فایل سل)

ویدئو آموزشی کسب درآمد میلیونی با بازاریابی فایل در وردپرس(آموزش توسط رتبه 10 فایل سل) فرمت فایل : MPG- نوع فایل (ویدئو-قابل نمایش روی کامپیوتر و رسانه های دیجیتال)   تعداد فایل ها : 3 فایل ویدیویی(3 بخش)   کیفیت فایل ها : عالی(Full Hd)   حجم فایل های ویدیویی : 230 مگابایت    توضیح محصول : این ویدئو بطور کامل بازاریابی فایل توسط وردپرس را معرفی و آموزش داده است مدرس این ویدئو مدیر فروشگاه پارس است که دارای رتبه کل 10 در فایل سل و رتبه یک فروش در ...

توضیحات بیشتر - دانلود 49,000 تومان

نظرسنجی

کدام نوع از فایل های زیر مورد نیاز شماست